ワンステップで
安全かつ迅速にRNAを検出
安全かつ迅速にRNAを検出
新型コロナウイルス検出用
PCR検査キット＆測定機器
SARS-CoV-2 RT PCR
- RNA精製は不要
- 検体採取後2分でPCR検出
- ウイルスの可溶化と核酸精製の同時処理
SARS-CoV-2 RT PCR
本キットは、新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)のORF1abおよびE遺伝子を定量的に検出する目的で使用できます。
このアッセイは、SARS-CoV-2に感染した肺炎の期間中、他の関連する症例との鑑別や、流行の緊急対策に対しての体外補助診断に使用されます。
SARS-CoV-2肺炎の診断とSARSCoV-2感染制御のための検査は、国の定められた規制に従う必要があります。
本キットは、実験室以外の保護環境でも操作でき、POCTの迅速な検出も実現できます。
①面棒を扁桃および後咽頭領域に挿入します。
綿棒で扁桃腺と咽頭後壁を舌、歯茎、そして歯に触れないようにこすります。
②保存液チューブのキャップを外し、綿棒をすぐにチューブに入れます。綿棒をチューブの縁に当てて、ブレークポイントで綿棒を切断し、綿棒をチューブに残します。
③保存液チューブのキャップを閉めて締め、チューブを少なくとも 3～5回強く振盪させます。
①口腔咽頭用綿棒を口に入れ、舌を使って綿棒を口の中で前後に30秒間押しながら唾液をコットン部分で吸い取ります。
この際には綿棒を噛んだりすることで綿棒の綿部分を壊さないでください。
②保存液チューブのキャップを外し、綿棒をすぐにチューブに入れます。
綿棒をチューブの縁に当てて、ブレークポイントで綿棒を切断し、綿棒をチューブに残します。
③保存液チューブのキャップを閉めて締め、チューブに少なくとも3～5回強く振盪させます。
検体保管：検体採取後2分でPCR検出に使用できます。
採取したサンプルは室温で24時間以内保存可能ですが、24時間を超える場合は-30℃以下で凍結保存してください。
すべての RT-PCR Buffer を Enzyme Mixture チューブに注ぎ、上下に少なくとも 3～5回混ぜてから、液体をスポイトの底に残します。
スポイトを垂直に保ち、混合物を 1滴、PCR 増幅チューブの底に静かに加えます。
スポイトを垂直に保ち、採取したサンプル、ポジティブコントロールとネガティブコントロールを1滴静かに加えます。蓋をしっかりと閉め、上下に振って混合物を完全に混ぜ、液体をチューブの底に貯めます。PCR測定機器に直接配置します。
PCRチューブをマシンに配置します。
結果判定
1)良好な結果を得るために、混合したRT-PCR増幅試薬とテストするサンプルの最初の1滴を破棄します。
2)RT-PCRBufferをEnzymeMixtureで調製したら、24時間以内に使い切ることをお勧めします(光を避けてください)。
残りは-20°Cで遮光保存してください。
本キットでは、適切に採取されたサンプルを用いて、ウイルスの可溶化と核酸精製の同時処理を行う事により、通常の核酸精製よりも簡便な「ワンステップ」で安全かつ迅速にRNA検出を行うことができます。
本キットでは、RNA逆転写反応とポリメラーゼ連鎖反応（PCR）をTaqManテクノロジーにより同時並行で進め、ウイルスの核酸配列に従って設計された特異的なプライマーで標的核酸断片を増幅します。
本キットのプライマーおよびプローブ設計領域は、疑陽性をなくすため、α、β、γ、δタイプや、変異を持つ関連遺伝子の既知の変異領域を最大限に回避しています。同時に特異的なTaqManプローブは、標的核酸フラグメントに結合することで、逆転写酵素/Taq酵素エキソヌクレアーゼ活性の作用により水分解され、蛍光シグナルを生成します。
リアルタイム増幅曲線は、蛍光シグナルと増幅サイクル数との関係により得られます。さらに、偽陰性およびPCR阻害は、InternalControlによって監視できます。
SARS-CoV-2のORF1ab遺伝子(FAMチャネル)およびE遺伝子(Cy5チャネル)は、品質管理された内部コントロール(VICチャネル)により定性的に検出されます。
本キットの検査結果は、他の関連する健康診断結果と組み合わせて総合的に分析する必要があり、診断の根拠として単独で使用しないでください。
検体の不合理な収集、輸送、保管、不適切な操作、不適切な実験室環境は、不正確な結果につながる可能性があります。
その他の検証されていない干渉液やPCR阻害剤は、偽陰性の結果をもたらす可能性があります。
SARS-CoV-2配列の新たな突然変異または他の理由による配列変化は、偽陰性の結果をもたらす可能性があります。
サンプル保存液にはウイルス溶解成分が含まれています。採取液に採取スワブを添加後、約2分で検体中のウイルスを完全に不活化でき、安全に操作できます。
試薬瓶の本体を絞ると、液体がなくなるのが正常です。液体は無毒で無害です。 皮膚にかかった場合はきれいな水でふき取ってください。
本キットは、市販の核酸精製キットで精製された核酸も検出できます。 精製核酸の添加量の上限は1反応あたり40μLです。
誤って2滴の混合試薬またはサンプルを添加すると、弱い陽性サンプルに偽陰性の結果が表示されることがあります。
正しい手順で再検査することをお勧めします。
1．本キットの最小検出限界：50コピー/mL
2．ヒトコロナウイルスHKU1などの他の一般的な呼吸器ウイルスとの交差反応はありません。SARSコロナウイルス、MERSコロナウイルス、ヒトコロナウイルスOC43、ヒトコロナウイルスNL63、ヒトコロナウイルス229E、インフルエンザAウイルス(H1N1、H3N2、H5N1、H7N9)。インフルエンザBウイルス(山形、ビクトリア)。RSウイルス（RSV-A、RSV-8）、パラインフルエンザウイルス（HPIVsl.HPIVs 2、HPIVs3）、ライノウイルス（RhV-A、RhV-8、RhV-C）、アデノウイルス（Ad1、Ad2、Ad3、Ad4、Ad5、Ad7、Ad55)およびヒトメタニューモウイルス。
3．弊社が提供する陰性用の基準テストにて陰性判定とします。
4．弊社が提供する陽性用の基準テストにて陽性判定とします。
5．LimitofDetection(LoD;最小検出感度)でのテストは20回施行し、検出率は90%以上であった。
6．高濃度および低濃度のサンプルはそれぞれ独立して10回検出し、Ct値の変動係数（CV、％）は5％以下であった。
